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ALTERACIONES EN LA ARQUITECTURA DEL BIOFILMS DE CANDIDA TROPICALIS: EFECTO DE UN NUEVO COMPUESTO CON ACTIVIDAD ANTIFÚNGICA

QUINTEROS, Melisa 1 | GARCÍA MARTÍNEZ, Joaquín C.2 | PÁEZ, Paulina L.3 | PARAJE, María Gabriela1

IMBIV-CONICET. CÁT. MICROBIOLOGÍA, FAC. CS. EXACTAS, FÍSICAS Y NATURALES, UNIV. NACIONAL DE CÓRDOBA 1; FACULTAD DE FARMACIA DE ALBACETE, UNIVERSIDAD DE CASTILLA 2; DEPARTAMENTO DE CIENCIAS FARMACÉUTICAS. FCQ. UNIVERSIDAD NACIONAL DE CÓRDOBA / UNITEFA - CONICET 3

Introducción y Objetivos:
Se ha descripto que las infecciones por Candida asociadas a biofilms son clínicamente relevantes debido a la resistencia multifactorial y la tolerancia a los agentes antifúngicos. Previamente, nuestro grupo de investigación demostró que un nuevo compuesto, el oligoestirilbenceno 14 (OSB14), presentó actividad antibiofilm y efecto sinérgico asociado a anfotericina B (AmB), con una erradicación del hasta 90% sobre el biofilm de Candida tropicalis.El objetivo de este trabajo fue evaluar los cambios en la topografía y arquitectura de biofilms maduros de C. tropicalisproducidos por la acción del compuesto OSB14 y de la asociación sinérgica con AmB.
Materiales y Métodos:
La estructura del biofilm se estudió mediante microscopia óptica (MO) por tinción con cristal violeta y por microscopía confocal de exploración láser (MCEL) utilizando calcofluor-white, como colorante. El análisis de las imágenes por MCEL fue realizado utilizando el software ImageJ. La caracterización de la arquitectura y morfología del biofilms se realizó mediante el análisis con el programa COMSTAT, que permitió evaluar y comparar distintos parámetros tales como biomasa, espesor, rugosidad, distancia de difusión y relación biomasa/biovolumen.
Resultados:
Por MO se observó que el biofilm formado por C. tropicalis NCPF 3111 presentaba blastosporas ovaladas, pseudohifas e hifas verdaderas. El análisis de las imágenes obtenidas de los biofilms tratados con el compuesto OSB14 solo y su combinación con AmB, tanto por MO como por MCEL, evidenció la reducción de la biomasa total de los biofilms, con respecto al control sin tratamiento. El análisis COMSTAT del biofilm tratado con el compuesto OSB14, arrojó una reducción de la biomasa del 90% con respecto al control y una reducción del 94% en la combinación sinérgica con AmB (*p<0,05). Los parámetros de COMSTAT arrojaron que, tanto la combinación como el antifúngico usado como referencia (AmB), presentaron el menor valor de espesor del biofilm y de distancia de difusión. Además, el coeficiente de rugosidad del biofilm tratado con el compuesto OSB14 fue mayor al control y similar a la combinación con AmB.
Conclusiones:
La información obtenida resulta relevante para comprender las modificaciones en la arquitectura y en el microentorno de biofilms de Candidatratados con este nuevo agente antifúngico, permitiendo profundizar distintos aspectos de su mecanismo de acción.