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Area: Patogenia | Nro de orden: 68

Modelo experimental de encefalitis causada por virus Río Negro, Alphavirus de circulación regional

Albrieu-Llinás, G(1); Rivarola, ME(1); De Olmos, S(2); Gruppi, A(3); Contigiani, MS(1)

(1) Laboratorio de Arbovirus, Instituto de Virología “Dr. JM Vanella”, Facultad de Ciencias Médicas, Universidad Nacional de Córdoba; (2) Servicio de Neuroanatomía e Histología Experimental, Instituto de investigación médica Mercedes y Martín Ferreyra (INIMEC-CONICET), Córdoba; (3) Centro de Investigación en Bioquímica Clínica e Inmunología (CIBICI-CONICET), Córdoba.

Contacto: guillermoalbrieu@gmail.com

El virus Río Negro (RNV, género Alphavirus) es una especie enzoótica del complejo antigénico Encefalitis Equina Venezolana (VEEV, subtipo VI). Teniendo en cuenta su comportamiento atenuado y diversos bio-marcadores, este y otros subtipos enzoóticos fueron reclasificados como especies diferentes. Si bien no ha causado brotes epidémicos, se ha demostrado por serología y detección molecular su circulación en mosquitos, equinos y humanos en Argentina y Paraguay. En nuestro laboratorio contamos con una cepa local de RNV aislada de roedores silvestres, capturados durante un brote de enfermedad febril en la provincia de Formosa (1991) y nuestro objetivo es caracterizar la enfermedad causada por esta cepa en ratones albinos suizos Rw1. Observamos que ratones adultos produjeron anticuerpos neutralizantes detectables a los 15 días post-infección (pi) y no desarrollaron signos de enfermedad ni viremias detectables por cuantificación de unidades formadoras de placa (ufp) en monocapa de células Vero. Sin embargo en ratones lactantes de diferentes edades (10-21 días) infectados con RNV registraron signos de morbilidad y mortalidad en curso temporal. Observamos altas tasas de mortalidad en animales de hasta 18 días de edad (100% en ese experimento). En estos animales infectados la titulación de virus en sangre demostró viremias relativamente bajas y efímeras, comenzando a las 24 horas pi, con un pico de 102 ufp/ml a las 30 horas pi, y volviéndose indetectables a las 48 horas pi. Se evaluó el órgano-tropismo mediante la titulación diaria de carga viral durante 10 días en muestras de diferentes tejidos de interés, observándose títulos altos en: cerebro, timo, páncreas, bazo, pulmón y ganglios linfáticos inguinales (determinaciones realizadas por triplicado). El título máximo en cerebro fue registrado al día 4 pi (media: 7.43 log ufp/g), aunque los síntomas neurológicos se hicieron visibles a partir del día 7 u 8 pi. Un análisis histopatológico de los tejidos mencionados teñidos con hematoxilina-eosina permitió identificar focos inflamatorios y meningitis en cerebro, e infiltrado inflamatorio y neumonitis en pulmones. Se observó una marcada pérdida de la arquitectura folicular en bazos y ganglios linfáticos. Además, se evaluó la neurodegeneración mediante tinción amino-cupro-argéntica de cortes de cerebros de ratones infectados, a los 2 y 8 dpi, observándose extensas áreas dañadas a los 8 dpi, sobre todo en corteza motora y cuerpo estriado, con focos densos alrededor de vasos sanguíneos. Estos resultados forman parte de la primera caracterización in vivo del RNV que muestra, no sólo evidencias sobre la capacidad patogénica en individuos cuyo sistema inmune podría no estar completamente desarrollado (ratones lactantes wild type), sino que también ofrece un nuevo modelo experimental para el estudio de la progresión de una infección con virus neurotrópico.