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Area: Patogenia | Nro de orden: 7

Estudio funcional del 3' UTR del virus Chikungunya en el ciclo de replicación viral en mosquitos

Merwaiss, F(1, 2); Filomatori, CV(1); Bardossy, ES(1); Saleh, MC(2); Alvarez DE(1)

(1) Instituto de Investigaciones Biotecnológicas, UNSAM; (2) Viruses and RNA Interference, Institut Pasteur

Contacto: fmerwaiss@iibintech.com.ar

Chikungunya es un arbovirus perteneciente al género Alphavirus de la familia Togaviridae que luego de 60 años de circulación exclusiva en Asia y África se ha expandido a Europa y las Américas. Notablemente, esta expansión ha sido asociada tanto a cambios puntuales en la secuencia de proteínas estructurales así como a variaciones drásticas en el 3' UTR, el cual contiene repeticiones de secuencia conservadas que varían en el número de copias entre los diferentes linajes. Nuestro grupo y otros han mostrado previamente que versiones de chikungunya recombinantes portando deleciones en el 3' UTR presentan una cinética de replicación disminuida en células de mosquito, mientras su replicación en células de mamífero no se ve afectada. Con el objetivo de analizar la importancia de estas repeticiones de secuencia específicamente en el ciclo replicativo en mosquitos y en su posterior trasmisión y expansión de la infección, realizamos infecciones de colonias de mosquitos tanto con virus como con deleciones en el 3' UTR. En primer lugar hicimos ensayos de competencia para evaluar el fitness de ambas variantes, obteniendo como resultado que los virus portando un 3' UTR intacto desplazan a los virus con deleciones en dicha región. A continuación estudiamos el Extrinsic Incubation Period (EIP), es decir el tiempo transcurrido entre la ingesta de sangre con virus y la capacidad de transmitir dicho virus, mediante la detección y titulación de UFP en midgut, cabeza y saliva de mosquitos infectados como una forma de medir la capacidad infectiva, la eficiencia de diseminación y la eficiencia de transmisión respectivamente, para cada una de las variantes virales. Nuestros resultados indican que el virus con un 3' UTR intacto tienen un EIP más corto y que en particular esta ventaja se debe a una mayor capacidad para salir del midgut durante el inicio del ciclo infeccioso. En base a estos resultados creemos que un estudio sistemático del 3' UTR viral podría proveer información relevante que correlacione la capacidad replicativa del virus con aspectos aun no conocidos de su patogénesis y evolución.